دوره 21، شماره 3 - ( مجلۀ علمی دانشگاه علوم پزشکی همدان-پائيز 1393 )                   جلد 21 شماره 3 صفحات 196-202 | برگشت به فهرست نسخه ها


XML English Abstract Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Mohammadi N, Karimi J, Shabab N, Naderi S, Yadegar Azari R, Saidijam M. Cloning of BMP-2 Gene and Its Expression Study in E. coli in Order to Produce a Recombinant Drug. Sci J Hamadan Univ Med Sci . 2014; 21 (3) :196-202
URL: http://sjh.umsha.ac.ir/article-1-77-fa.html
محمدی نژاد، کریمی جمشید، شباب نوشین، نادری سمانه، یادگار آذری رضا، سعیدی جم مسعود. کلونینگ و بررسی بیان ژن کد کننده BMP-2 انسانی در باکتری E. coli به منظور تولید یک داروی نوترکیب. مجله علمی دانشگاه علوم پزشکی همدان. 1393; 21 (3) :196-202

URL: http://sjh.umsha.ac.ir/article-1-77-fa.html


دانشيار زيست فن آوری پزشکی عضو مرکز تحقيقات پزشکی مولکولی و ژنتيک دانشگاه علوم پزشکی همدان، همدان، ايران ، sjam110@yahoo.com
چکیده:   (1476 مشاهده)

مقدمه و هدف: پروتئین های مورفوژنتیک استخوانی، گروهی از سایتوکاین های متعلق به ابرخانواده TGFβ می باشند. این پروتئین ها در تکامل بسیاری از ارگان ها و بافت ها، طی دوران جنینی و پس از آن در ترمیم و بازسازی بافت های استخوان و غضروف، نقش دارند. هدف از این مطالعه، کلونینگ و بررسی بیان این پروتئین در باکتری E.Coli می باشد.

روش کار: در این مطالعه تجربی توالی cDNA مربوط به پپتید بالغ پروتئین مورفوژنتیک انسانی2 (BMP-2) در باکتری E.Coli کلون شد. پلاسمید نوترکیب pET28a/BMP-2 پس از توالی  یابی به باکتری بیانی (E.coli BL21(DE3 ترانسفرم گردید. باکتری نوترکیب در محیط LB مایع حاوی آنتی بیوتیک کانامایسین در دمای C°37 کشت داده شد. القا با IPTG صورت گرفت. بررسی بیان به کمک RT-PCR و SDS-PAGE و تأیید بیان با وسترن بلاتینگ انجام شد.

 نتایج: توالی ژنی به کمک PCR تکثیر یافت. بعد از آماده سازی ژن و پلاسمید، واکنش اتصال صورت گرفت. توالی یابی، صحت کلونینگ را نشان داد. بررسی بیان با RT-PCR و SDS-PAGE نشان دهنده بیان پروتئین بود. وسترن بلاتینگ نتایج را تأیید کرد.

نتیجه نهایی: بیان بالای پروتئین نوترکیب در سیستم پروکاریوتی حاصل شد. استفاده از غلظت های متفاوت القا کننده در ساعت های مختلف نشان داد که 4 ساعت بعد از القا با غلظت 1mM از IPTG ، بیشترین بیان را داریم.

متن کامل [PDF 282 kb]   (1336 دریافت)    
نوع مطالعه: پژوهشي | موضوع مقاله: تخصصي

ارسال نظر درباره این مقاله : نام کاربری یا پست الکترونیک شما:
کد امنیتی را در کادر بنویسید

ارسال پیام به نویسنده مسئول


کلیه حقوق این وب سایت متعلق به مجله علمی دانشگاه علوم پزشکی و خدمات بهداشتی درمانی همدان می باشد.

طراحی و برنامه نویسی : یکتاوب افزار شرق

© 2015 All Rights Reserved | Scientific Journal of Hamadan University of Medical Sciences

Designed & Developed by : Yektaweb