fa امکان استفاده از آنزیم EcoR1 در طبقه بندی سویه های اکانتامبای ایزوله شده از التهاب قرنیه سایر تخصص هاي باليني Other Clinical Specialties پژوهشي Original <p dir="RTL" style="text-align: justify;">امروزه التهاب قرنیه ناشی از اکانتامبا در میان افرادی که از لنزهای طبی و زینتی استفاده می کنند روبه افزایش می باشد<span dir="LTR"> . </span>آلودگی لنزها معمولا<span dir="LTR"> &quot; </span>از طریق تماس آنها با آب و محلول های ضد عفونی کننده مخصوص نگهداری آنها که قدرت ضد عفونی کنندگی آ نها کاهش یافته و بطریقی با انگل آلوده شده است صورت می گیرد<span dir="LTR"> .</span>اگر همراه این آلودگی باکتری هم وجود داشته باشد ، آمیب باکتری را بعنوان ماده غذایی مورد استفاده قرار داده و رشد و تکثیر می نماید<span dir="LTR"> . </span>در این موارد آکانتامبا می تواند به سطح لنزها چسبیده و در موقع استفا ده از لنز ، انگل به اپی تلیوم قرنیه نفوذ کرده و سبب ایجاد یک التهاب دردناک و شدید قرنیه شود که ممکن است تشخیص آن از سایر اشکال التهاب قرنیه مشکل باشد<span dir="LTR"> . </span>هدف از انجام این پژوهش که در سال<span dir="LTR"> 1994 </span>در مرکز تحقیقات دانشگاه منچستر انجام گردید در مرحله اول معرفی روش ت شخیص آزمایشگاهی اکانتامبا در التهاب قرنیه بوده و سپس تعیین گونه های جدا شده از موارد عفونت با روش هضم <span dir="LTR">DNA</span> آمیب به کمک آنزیم <span dir="LTR">EcoR 1 </span>از طریق نشان دادن <span dir="LTR">PELPs</span> روی پل الکتروفورز می باشد<span dir="LTR">.</span></p> <p dir="RTL" style="text-align: justify;">در این بررسی بدنبال تشخیص التهاب قرنیه با نمونه برداری از قرنیه و یا محلول مخصوص نگهداری لنزها از محیط <span dir="LTR">&nbsp;(Proteose peptone Yeast extract Glucose) PYG</span> برای پرورش و تکثیر آمیب جهت تهیه &nbsp;سوسپانسیون لازم برای استخراج <span dir="LTR">DNA</span> آمیب استفاده شد<span dir="LTR"> . </span>تروفوزوئیت ها در یک محیط کشت مایع عاری از باکتری رشد و تکثیر داده شدند و سپس هضم کامل<span dir="LTR">DNA</span> سلول بوسیله آنزیم <span dir="LTR">Restriction endonuclease</span> برای نشان دادن <span dir="LTR">&nbsp;(Restriction fragment length polymorphisms) RFLPs</span> بر روی پل الکتروفورز انجام شد<span dir="LTR">. </span>این تکنیک برای مطالعه و تمایز<span dir="LTR"> 20 </span>مورد اکانتامبای جدا شده از بیوپسی قرنیه و یک مورد از محلول نگهدارنده لنز که از لحاظ مرفولوژی بهم شباهت داشتند مورد استفاده قرار گرفت که در آن <span dir="LTR">DNA</span> آمیب به کمک آنزیم (<span dir="LTR">EcoR1</span>) هضم و&nbsp; سپس الکتروفورز گردید<span dir="LTR">.</span></p> <p dir="RTL" style="text-align: justify;">نتایج بدست آمده از الگوی الکتروفورز آنها را به هفت گروه تقسیم نمود<span dir="LTR">.</span></p> <p dir="RTL" style="text-align: justify;">نتیجه نهائی اینکه شناسائی دقیق این سویه ها و مقایسه با سویه های استاندارد یا شناخته شده نیاز به پژوهش بیشتر در این زمینه دارد<span dir="LTR">.</span></p> <p dir="RTL" style="text-align: justify;"></p> <p style="text-align: justify;">Acanthamoeba keratitis is increasingly being diagnosed among people who wear thrapeutic and cosmetic contact lenses. The chain of events is thought to begin with contamination of the contact lens storage cases with Acanthamoeba from household or mains water supplies. If bacteria contamination is also present then these amoebas can multiply by ingesting the bacteria as a food source. If the contact lens is then immersed in the storage case and inadequately disinfected as Acanthamoeba can sometime adhere to it and so to the corneal epithelium and causes a severe and extremely painful keratitis which may be difficult to distinguish from other forms of keratitis.</p> <p style="text-align: justify;">The following diagnosis of Acanthamoeba keratitis using corneal biopsies and contact lens storage containers, PYG medium was used for harvesting the Acanthamoeba and was followed by DNA extraction.</p> <p style="text-align: justify;">The trophzoites adapted to axenic (bacteria free) growth in liquid media and characterized by restriction endonuclease digestion of whole-cell DNA to detect restriction fragment length polymorphisms (RFLPs) on agarose gel electrophoresis. This technique was used to study the relationship between morphologically identical strains of 20 isolates from corneal biopsies and one from contact lens storage container. DNA samples digested with EcoR1 and separated by agarose gel electrophoresis divided the strains into seven groups.</p> اکانتامبا / التهاب قرنیه / لنز Acanthamoeba / Keratitis / Lens 0 0 http://sjh.umsha.ac.ir/browse.php?a_code=A-11-185-157&slc_lang=fa&sid=1 Siavash Sadeghian سیاوش صادقیان 10031947532846003850 10031947532846003850 Yes