fa مطالعه ایمونوهیستوشیمیایی تغییرات کلاژن نوع IV در غشای پایه کلافه های گلومرولی در موشهای دیابتی نژاد Balb/c سایر تخصص هاي باليني Other Clinical Specialties پژوهشي Original <p dir="rtl" style="text-align: justify"><span id="ctl00_ContentPlaceHolder1_DataList1_ctl00_abstractLabel" style="color: rgb(45, 135, 179) font-family: tahoma font-size: 12px font-style: normal font-variant: normal font-weight: normal letter-spacing: normal orphans: auto text-align: -webkit-right text-indent: 0px text-transform: none white-space: normal widows: 1 word-spacing: 0px -webkit-text-stroke-width: 0px line-height: 15pt background-color: rgb(247, 246, 243)"><strong><span style="font-size: 9pt">مقدمه و هدف:</span></strong><font size="2"> ماده خارج سلولی دارای ماکرومولکولهای متعددی است که از آن جمله می توان به ترکیباتی از قبیل انواع کلاژن اشاره نمود. از آنجا که کلاژن نوع </font><span dir="ltr" style="font-size: 9pt">IV</span><font size="2"> نقش تعیین کننده ای در تشکیل غشای پایه و بافت مزانشیال گلومرولهای کلیوی ایفا می نماید, استرس های اکسیداتیو ناشی از محیط های هیپر گلیسمیک یکی از عواملی است که می تواند با تاثیر گذاری بر افزایش سنتز این نوع کلاژن روند فیلتراسیون گلومرولی را تحت تاثیر قرار دهد و از این طریق بر ساختمان بافتی و عملکرد کلیه ها تاثیر بگذارد. لذا در پژوهش حاضر سعی گردیده است تا تغییرات ناشی از دیابت در میزان کلاژن غشای پایه کلافه های گلومرولی مورد مطالعه و ارزیابی قرار گیرد.</font></span></p> <p dir="rtl" style="text-align: justify"><span id="ctl00_ContentPlaceHolder1_DataList1_ctl00_abstractLabel" style="color: rgb(45, 135, 179) font-family: tahoma font-size: 12px font-style: normal font-variant: normal font-weight: normal letter-spacing: normal orphans: auto text-align: -webkit-right text-indent: 0px text-transform: none white-space: normal widows: 1 word-spacing: 0px -webkit-text-stroke-width: 0px line-height: 15pt background-color: rgb(247, 246, 243)"><font size="2"><strong>روش کار : </strong>برای این مطالعه تجربی از 24 موش نر دو ماهه نژاد</font> <span dir="ltr" style="font-size: 9pt">balb/c</span><span style="font-size: 10pt"> استفاده شد که بطور تصادفی به دو گروه تجربی و دو گروه کنترل 1 و 2 تقسیم شدند. در مرحله بعد سلولهای بتای جزایر لانگرهانس پانکراس نمونه های مربوط به گروههای تجربی با استفاده از تزریق </span><span dir="ltr" style="font-size: 9pt"> mg/kg</span><span style="font-size: 10pt">160</span><span style="font-size: 10pt"> آلوکسان تخریب گردید و گروههای کنترل بدون دریافت آلوکسان بصورت دست نخورده باقی ماندند. سپس به منظور بررسی تفاوت تغییرات کوتاه مدت و دراز مدت تاثیر دیابت بر کلیه و مقایسه آن با گروههای کنترل با استفاده از آنتی بادی مونوکلونال که بر علیه کلاژن نوع </span><span dir="ltr" style="font-size: 9pt">IV</span><span style="font-size: 10pt"> به کار گرفته شد, تغییرات غشای پایه گلومرولهای کلیوی در گروه تجربی1 و کنترل 1 پس از 8 هفته و گروه تجربی2 و کنترل 2 پس از 16 هفته از شروع دیابت مورد مطالعه قرار گرفت. علاوه بر این, حجم کلافه های گلومرولی نیز با استفاده از تکنیک های استریولوژیکی, در گروههای تجربی وکنترل مورد مقایسه قرار گرفت.</span></span></p> <p dir="rtl" style="text-align: justify"><span id="ctl00_ContentPlaceHolder1_DataList1_ctl00_abstractLabel" style="color: rgb(45, 135, 179) font-family: tahoma font-size: 12px font-style: normal font-variant: normal font-weight: normal letter-spacing: normal orphans: auto text-align: -webkit-right text-indent: 0px text-transform: none white-space: normal widows: 1 word-spacing: 0px -webkit-text-stroke-width: 0px line-height: 15pt background-color: rgb(247, 246, 243)"><strong>نتایج :</strong><font size="2"> یافته های این پژوهش نشان داد که هرچند تفاوت قابل ملاحظه ای بین گروههای تجربی و کنترل 1 وجود ندارد اما در مقایسه بین گروههای تجربی و کنترل 2 این اختلاف معنی دار است. بر این اساس واکنش غشای پایه کلافه های گلومرولی نمونه های دیابتیک نسبت به آنتی بادی کلاژن نوع </font><span dir="ltr" style="font-size: 9pt">IV</span><font size="2">مثبت و ضخامت غشای پایه کلافه های گلومرولی نیز در گروه دیابتیک 16 هفته ای نسبت به سایر گروهها به شکل معنی داری نسبت به گروه کنترل و تجربی 1 نیز افزایش یافته است (p<0.05</font><font size="2">) در حالیکه این تفاوت بین گروه کنترل و گروه دیابتیک 8 هفته ای معنی دار به نظر نمی رسد.</font><span dir="ltr" style="font-size: 9pt"> </span><font size="2"><span>علاوه بر این در اندازه گیری کلافه های گلومرولی افزایش حجم مشخصی در بافت مزانژیال گروه 16 هفته ای دیده می شود  (10⁶</span></font></span><span style="color: rgb(45, 135, 179) font-family: tahoma font-size: 12px font-style: normal font-variant: normal font-weight: normal letter-spacing: normal orphans: auto text-align: -webkit-right text-indent: 0px text-transform: none white-space: normal widows: 1 word-spacing: 0px -webkit-text-stroke-width: 0px line-height: 15pt background-color: rgb(247, 246, 243)"><font size="2"><span>&mum³x4.635∓0.289</span><font size="2">) که این تغییر حجم در گروه 8 هفته ای (10⁶&mum³x3.504∓0.189) و کنترل (10⁶&mum³x3.422∓0.140) معنی دار به نظر نمی رسد.</font></font></span></p> <p style="text-align: justify"><span id="ctl00_ContentPlaceHolder1_DataList1_ctl00_abstractLabel" style="color: rgb(45, 135, 179) font-family: tahoma font-size: 12px font-style: normal font-variant: normal font-weight: normal letter-spacing: normal orphans: auto text-align: -webkit-right text-indent: 0px text-transform: none white-space: normal widows: 1 word-spacing: 0px -webkit-text-stroke-width: 0px line-height: 15pt background-color: rgb(247, 246, 243)"><strong><span dir="rtl" style="font-size: 9pt">نتیجه نهائی :</span></strong><span dir="rtl" style="font-size: 10pt"> </span><span dir="rtl" style="font-size: 10pt">ابتلا به دیابت در دراز مدت می تواند از طریق واکنش بافت مزانژیال و غشای پایه گلومرول ها و توبول های کلیوی در مقابله</span></span><span id="ctl00_ContentPlaceHolder1_DataList1_ctl00_abstractLabel" style="color: rgb(45, 135, 179) font-family: tahoma font-size: 12px font-style: normal font-variant: normal font-weight: normal letter-spacing: normal orphans: auto text-align: -webkit-right text-indent: 0px text-transform: none white-space: normal widows: 1 word-spacing: 0px -webkit-text-stroke-width: 0px line-height: 15pt background-color: rgb(247, 246, 243)"><span dir="rtl" style="font-size: 10pt"> </span></span><span id="ctl00_ContentPlaceHolder1_DataList1_ctl00_abstractLabel" style="color: rgb(45, 135, 179) font-family: tahoma font-size: 12px font-style: normal font-variant: normal font-weight: normal letter-spacing: normal orphans: auto text-align: -webkit-right text-indent: 0px text-transform: none white-space: normal widows: 1 word-spacing: 0px -webkit-text-stroke-width: 0px line-height: 15pt background-color: rgb(247, 246, 243)"><span dir="rtl" style="font-size: 10pt">با </span></span><span id="ctl00_ContentPlaceHolder1_DataList1_ctl00_abstractLabel" style="color: rgb(45, 135, 179) font-family: tahoma font-size: 12px font-style: normal font-variant: normal font-weight: normal letter-spacing: normal orphans: auto text-align: -webkit-right text-indent: 0px text-transform: none white-space: normal widows: 1 word-spacing: 0px -webkit-text-stroke-width: 0px line-height: 15pt background-color: rgb(247, 246, 243)"><span dir="rtl" style="font-size: 10pt">غلظت بالای گلوکز به ترشح بیش از حد کلاژن نوع</span></span><span id="ctl00_ContentPlaceHolder1_DataList1_ctl00_abstractLabel" style="color: rgb(45, 135, 179) font-family: tahoma font-size: 12px font-style: normal font-variant: normal font-weight: normal letter-spacing: normal orphans: auto text-align: -webkit-right text-indent: 0px text-transform: none white-space: normal widows: 1 word-spacing: 0px -webkit-text-stroke-width: 0px line-height: 15pt background-color: rgb(247, 246, 243)"><span dir="rtl" style="font-size: 10pt"> IV منجر شود که این موضوع به سهم خود به افزایش حجم کلافه ای و کاهش</span></span><span id="ctl00_ContentPlaceHolder1_DataList1_ctl00_abstractLabel" style="color: rgb(45, 135, 179) font-family: tahoma font-size: 12px font-style: normal font-variant: normal font-weight: normal letter-spacing: normal orphans: auto text-align: -webkit-right text-indent: 0px text-transform: none white-space: normal widows: 1 word-spacing: 0px -webkit-text-stroke-width: 0px line-height: 15pt background-color: rgb(247, 246, 243)"><span dir="rtl" style="font-size: 10pt"> </span></span><span id="ctl00_ContentPlaceHolder1_DataList1_ctl00_abstractLabel" style="color: rgb(45, 135, 179) font-family: tahoma font-size: 12px font-style: normal font-variant: normal font-weight: normal letter-spacing: normal orphans: auto text-align: -webkit-right text-indent: 0px text-transform: none white-space: normal widows: 1 word-spacing: 0px -webkit-text-stroke-width: 0px line-height: 15pt background-color: rgb(247, 246, 243)"><span dir="rtl" style="font-size: 10pt">فیلتراسیون گلومرولی کمک می نماید.</span></span></p> <p background-color:="" direction:="" font-size:="" font-style:="" font-variant:="" font-weight:="" letter-spacing:="" line-height:="" new="" style="color: rgb(45, 135, 179) font-family: " text-align:="" text-indent:="" text-transform:="" times="" unicode-bidi:="" white-space:="" widows:="" word-spacing:=""><strong><font size="2">Introduction & Objective:</font></strong><span style="font-size: 11pt"> </span><span style="font-size: 12pt">Extra-cellular matrix and basement membrane play important roles in many developmental phenamenon during development and after birth.</span><span style="font-size: 8pt"> </span><span style="font-size: 12pt">Among</span><span style="font-size: 7pt"> </span><span style="font-size: 12pt">the components of the basement membrane, collagen fibers specially type IV, are the most important part of this area. As kidney is</span><span style="font-size: 8pt"> </span><span style="font-size: 12pt">one of the target organs in diabetes mellitus and diabetic nephropathy is a major cause of end stage-renal disease and result an increase in morbidity and mortality of effected individuals, therefore early diagnosis leads to better treatment. The aim of this investigation was to study the primary diagnostic parameters by special regards to collagen IV fibers.</span></p> <p background-color:="" direction:="" font-size:="" font-style:="" font-variant:="" font-weight:="" letter-spacing:="" line-height:="" new="" style="color: rgb(45, 135, 179) font-family: " text-align:="" text-indent:="" text-transform:="" times="" unicode-bidi:="" white-space:="" widows:="" word-spacing:=""><font size="2"><strong>Materials & Methods:</strong> </font><span style="font-size: 12pt">In this study, 24 male</span><span style="font-size: 12pt"> balb/c mice</span><span style="font-size: 12pt"> were divided into experimental and control groups. In experimental group, t</span><span style="font-size: 12pt">he beta cells of Langerhance were chemically destroyed by an injection of 160 mg/kg alloxan and subdivided in experimental groups 1 and 2.</span><span style="font-size: 12pt"> Controls were kept untreated. Experimental group 1and 2 were sacrified 8 and 16 weeks after treatment with alloxan respectively. The same procedure was performed for control group. Immunohistochmical studies were carried out using monocolonal antibody against collagen type IV in Glomeruli. In addition, using morphometrical and stereological methods the volume of the glumerles was compared in all groups.</span></p> <p background-color:="" font-size:="" font-style:="" font-variant:="" font-weight:="" letter-spacing:="" line-height:="" new="" style="color: rgb(45, 135, 179) font-family: " text-align:="" text-indent:="" text-transform:="" times="" white-space:="" widows:="" word-spacing:=""><strong><font size="2">Results:</font></strong><span style="font-size: 12pt"> </span><span style="font-size: 12pt">Our finding showed that in experimental groups with special regards in 16 weeks diabetic mice, the rate of collagen type IV in basement membrane around the parietal layer of Bowman capsule, mesangial cells and endothelium of capillary in glomerules increased significantly compared to controls and experimental group 1 (p<0.05), while there was not a significant difference among experimental group 2 and controls. Our data also revealed that the number of mesangial cells as well as glomerular volume increased significantly in experimental 2 (4.635</span><span style="font-size: 12pt">±0.289<span dir="rtl">×</span>10⁶µm³</span><span style="font-size: 12pt">) compared to experimental 1 (3.504</span><span style="font-size: 12pt">±0.189<span dir="rtl">×</span>10⁶µm³</span><span style="font-size: 12pt">) and controls (3.422</span><span style="font-size: 12pt">±0.140<span dir="rtl">×</span>10⁶µm³</span><span style="font-size: 12pt">)<span dir="rtl">.</span></span></p> <p background-color:="" font-size:="" font-style:="" font-variant:="" font-weight:="" letter-spacing:="" line-height:="" new="" style="color: rgb(45, 135, 179) font-family: " text-align:="" text-indent:="" text-transform:="" times="" white-space:="" widows:="" word-spacing:=""><strong><span style="font-size: 10pt">Conclusion:</span></strong><span style="font-size: 11pt"> </span><span style="font-size: 12pt">This study indicated that any increase in the amount of collagen type IV in glomerules as well as mesangial cells and glomeruli volume which may happen early in diabetes mellitus, could be able to affect the physiology of the kidneys and it is a helpful tool for early diagnosis of affected kidney<span dir="rtl">.</span></span></p> دیابت شیرین , غشای پایه گلومرولی , کلاژن نوع IV , موش Collagen Type IV , Diabetes Mellitus , Glomerular Basement Membrane , Mice 5 11 http://sjh.umsha.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-2-444&slc_lang=fa&sid=1 Mahdi Jalali مهدی جلالی Mejalaly@yahoo.co.in 10031947532846001880 10031947532846001880 Yes Mohammad Reza Nikravesh محمدرضا نیکروش 10031947532846001881 10031947532846001881 No