fa بررسی و مقایسه محتوی پروتئینی پروماستیگوت وآماستیگوت لیشمانیا ماژور تهیه شده در محیط کشت با استفاده از روش الکتروفورز ژل پلی اکریلامید سایر تخصص هاي باليني Other Clinical Specialties پژوهشي Original <p align="justify"> <strong>مقدمه و هدف</strong>: لیشمانیا تک یاخته ای ازخانواده تریپانوزوماتیده ازرده سارکوماستیگوفورا می باشدکه دارای دو مرحله ی قابل تشخیص در چرخه ی زندگی خود است. فرم پروماستیگوت، فلاژل دار و متحرک بوده و در روده پشه خاکی ناقل تکثیر می یابد. فرم آماستیگوت، غیر متحرک بوده و در داخل ماکروفاژهای میزبان پستاندار مستقر می گردد. یکی از راه های مبارزه مؤثر با یک میکروارگانیسم ، شناسایی آنتی ژن های هدف اختصاصی آن می باشد. همچنین تولید واکسن های کارآمد متضمن تعیین هویت و تولید و تخلیص ایمونوژن های مصونیت بخش است . هدف از انجام این مطالعه ، یافتن محتوی پروتئینی آماستیگوت و پروماستیگوت، شناسایی پروتئین های هر مرحله از انگل، مقایسه این یافته ها و دستیابی به تفاوت ها و شباهت های آنها با یکدیگر بوده است. </p><p align="justify"><strong>روش کار</strong>: این مطالعه یک مطالعه مقطعی بوده و برای نیل به اهداف از پیش تعیین شده ، نمونه L.major (MRHO/IR/75/ER) از موش های Balb/c از قبل آلوده شده به محیط کشت NNN اصلاح شده و سپس به محیط مایع کشت سلولی RPMI-1640 انتقال داده شد. برای تهیه اشکال آماستیگوت از محیط RPMI-1640 با PH 5/5 در دمای c° 37 و حضور 5% Co2 استفاده شد. الکتروفورز به روش سدیم دودسیل سولفات (SDS-PAGE) انجام گردید و اوزان ملکولی باندهای حاصل از دو آنتی ژن مقایسه گردید. </p><p align="justify"><strong>نتایج</strong>: باندهای مشترک میان هر دو فرم، باندهای با وزن ملکولی 130 تا 110، 96، 94، 90، 80، 65، 63، 50، 36 و 19 کیلو دالتون بودند. باندهای مختص پروماستیگوت، باندهای با وزن ملکولی 22،28،46 کیلودالتون بود. همچنین باندهای 12 و 35 کیلودالتونی فقط در فرم آماستیگوت دیده شد. </p><p align="justify"><strong>نتیجه نهایی</strong>: با توجه به نتایج مطالعه حاضر انگل لیشمانیا در مراحل پروماستیگوت و آماستیگوت واجد پروتئین های اختصاصی همان مرحله است . طبق تحقیقات انجام شده آماستیگوت های اکسنیک و بافتی مشابه هستند در نتیجه با تکیه بر آنتی ژن های اختصاصی هر مرحله ، می توان در جهت طراحی و تهیه واکسن و داروهای مؤثر برضد انگل گام برداشت . </p> <p align="justify"> <strong>Introduction & Objective</strong>: Leishmania is a protozoan of the trypanosomatidae family. This protozoan has two stages in its life cycle, promastigote form in sand flies and amastigote form in macrophage of mammalian hosts. The purpose of this study was identification and comparison of proteins of Leishmania amastigote and promastigote stages. </p><p align="justify"><strong>Materials & Methods</strong>: The present study is a cross sectional study of two forms of Leishmania major. To culture promastigotes , L.major (MRHO/IR/75/ER) from previously infected Balb/c mice was transferred to modified N.N.N medium with overlay of liquid BHI and then transferred to RPMI-1640 at 26oc ± 1 for mass production. After isolation and growth, promastigotes were transferred to liquid cell culture medium RPMI-1640 with pH 5.5 and incu-bated at 5% CO2 at 37oc for 72 hours until promastigote to amastigote transformation. Elec-trophoresis was performed with SDS-PAGE method to find and compare the molecular weight of the antigens of two stages. </p><p align="justify"><strong>Results</strong>: The molecular weights of the bands observed in both forms were as follows: 19, 36, 50, 63, 65, 80, 90, 94, 96, 110- 130 KDa. The proteins in the surface of only promastigote were 22, 28 and 46 KDa and special proteins in the surface of amastigote were 12 and 32 KDa. <strong>Conclusion</strong>: According to this study Leishmania parasite has stage specific proteins. Various studies have shown that axenic amastigotes and tissue amastigotes are similar in their protein content. Therefore, based on stage specific proteins ,effective drugs and vaccines can be de-signed against leishmaniasis. </p> آماستیگوت , پروماستیگوت , دودسیل سولفات سدیم , لیشمانیا ماژور Amastigote , Leishmania major , Promastigote , Sodium Dodecyl Sulfate 1 8 http://sjh.umsha.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-2-122&slc_lang=fa&sid=1 Simindokht Soleimanifard سیمین دخت سلیمانی فرد 1003194753284600545 1003194753284600545 No Reza Arjmand رضا ارجمند 1003194753284600546 1003194753284600546 No Seyyed Hosein Hejazi سیدحسین حجازی hejazi@med.mui.ac.ir 1003194753284600547 1003194753284600547 Yes