fa تایپینگ سالمونلاهای تیفوئیدی با روش تخلیص پروتئینهای محلول در آب و بکارگیری تکنیک SDS-PAGE سایر تخصص هاي باليني Other Clinical Specialties پژوهشي Original <p dir="rtl" style="text-align: justify"><span id="ctl00_ContentPlaceHolder1_DataList1_ctl00_abstractLabel" style="color: rgb(45, 135, 179) font-family: tahoma font-size: 12px font-style: normal font-variant: normal font-weight: normal letter-spacing: normal orphans: auto text-align: -webkit-right text-indent: 0px text-transform: none white-space: normal widows: 1 word-spacing: 0px -webkit-text-stroke-width: 0px line-height: 15pt background-color: rgb(247, 246, 243)"><strong><span style="font-size: 9pt">مقدمه و هدف:</span></strong><font size="2"> سالمونلا ها از مهمترین باکتریهای خانواده انتروباکتریاسه هستند که موجب عفونتهای سیستمیک در انسان و حیوانات میشوند.هدف از این مطالعه جداسازی و تایپینگ سالمونلاهای تیفوئیدی با روش پلی اکریل آمید ژل الکتروفروزیس </font><span dir="ltr" style="font-size: 9pt">SDS-PAGE</span><font size="2"> <span>و مقایسه آن با روش سروتایپینگ میباشد.</span></font></span></p> <p dir="rtl" style="text-align: justify"><span id="ctl00_ContentPlaceHolder1_DataList1_ctl00_abstractLabel" style="color: rgb(45, 135, 179) font-family: tahoma font-size: 12px font-style: normal font-variant: normal font-weight: normal letter-spacing: normal orphans: auto text-align: -webkit-right text-indent: 0px text-transform: none white-space: normal widows: 1 word-spacing: 0px -webkit-text-stroke-width: 0px line-height: 15pt background-color: rgb(247, 246, 243)"><strong><span style="font-size: 9pt">روش کار</span></strong><strong><font size="2"> </font></strong><strong><span style="font-size: 9pt">:</span></strong><font size="2"><strong> </strong>در این مطالعه توصیفی ـ مقطعی تعداد یکصد مورد سالمونلا که از آزمایشگاه های مراکز درمانی شهر همدان جمع آوری شده بود به همراه 4 سویه رفرانس سالمونلا و 5 سویه رفرانس دیگر از خانواده انتروباکتریاسه مورد آزمایش قرار گرفتند. سروتایپینگ نمونه ها با آنتی سرمهای منووالان بیومریو و دیفکو انجام گرفت و الکتروفورز پروتئین های ساختمانی آنها نیز در ژل 10% پلی آکریل آماید انجام گرفت. پس از رنگ آمیزی ژل ها با آبی کوماسی ، اوزان مولکولی باندهای حاصل از الکتروفورز سویه های مورد مطالعه با استفاده از منحنی مربوط به باندهای حاصل از پروتئین های استاندارد مشخص گردید و توسط دستگاه دنسیتومتر مورد آنالیز قرار گرفتند.</font></span></p> <p dir="rtl" style="text-align: justify"><span id="ctl00_ContentPlaceHolder1_DataList1_ctl00_abstractLabel" style="color: rgb(45, 135, 179) font-family: tahoma font-size: 12px font-style: normal font-variant: normal font-weight: normal letter-spacing: normal orphans: auto text-align: -webkit-right text-indent: 0px text-transform: none white-space: normal widows: 1 word-spacing: 0px -webkit-text-stroke-width: 0px line-height: 15pt background-color: rgb(247, 246, 243)"><strong><span style="font-size: 9pt">نتایج :</span></strong><font size="2"> از یکصد مورد سالمونلای جداشده از بیماران 43 مورد (43%) مربوط به سالمونلا تیفی، 20 مورد (20%) سالمونلا تیفی موریوم، 12مورد(12%) سالمونلا پارا تیفی </font><span dir="ltr" style="font-size: 9pt">B</span><font size="2">، 10 مورد (10%) سالمونلا پاراتیفی </font><span dir="ltr" style="font-size: 9pt">C</span><font size="2"> و یک مورد سالمونلا پارا تیفی </font><span dir="ltr" style="font-size: 9pt">A</span><font size="2"> و بقیه نیز غیر تیفوئیدی بودند. در روش الکتروفورز باندهای پروتئینی زیادی از مولکولهای بزرگ بیش از 220 کیلو دالتون (</font><span dir="ltr" style="font-size: 9pt">KDa</span><font size="2">) تا مولکولهای کوچک کمتر از 18.5 کیلو دالتون بدست آمد که به خوبی باعث تمایز سویه ها از یکدیگر گردید و بر این اساس سالمونلا تیفی به 5 زیرگروه و سالمونلا پارا تیفی </font><span dir="ltr" style="font-size: 9pt">B</span><font size="2"> و </font><span dir="ltr" style="font-size: 9pt">C</span><font size="2"> هرکدام به 3 زیرگروه تقسیم شدند. همچنین الگوی پروتئینی سویه های رفرانس سالمونلا اختلاف عمده ای با الگوی پروتئینی سویه های رفرانس انتروباکتریاسه از خود نشان دادند، با اینحال یک باند پروتئینی مشترک در ناحیه 43 کیلو دالتون در مقایسه با الگوی پروتئینی سویه های رفرانس انتروباکتریاسه مشاهده گردید.</font></span></p> <p><span id="ctl00_ContentPlaceHolder1_DataList1_ctl00_abstractLabel" style="color: rgb(45, 135, 179) font-family: tahoma font-size: 12px font-style: normal font-variant: normal font-weight: normal letter-spacing: normal orphans: auto text-align: -webkit-right text-indent: 0px text-transform: none white-space: normal widows: 1 word-spacing: 0px -webkit-text-stroke-width: 0px line-height: 15pt background-color: rgb(247, 246, 243)"><strong><span dir="rtl" style="font-size: 9pt">نتیجه نهائی :</span></strong><span dir="rtl" style="font-size: 10pt"> نتایج این مطالعه نشان داد که تخلیص پروتئینهای محلول در آب سالمونلاها با بکارگیری تکنیک <span style="font-size:12px">SDS-PAGE</span> </span><span dir="rtl" style="font-size: 10pt"> می تواند بعنوان یک</span></span><span style="color: rgb(45, 135, 179) font-family: tahoma font-size: 12px font-style: normal font-variant: normal font-weight: normal letter-spacing: normal orphans: auto text-align: -webkit-right text-indent: 0px text-transform: none white-space: normal widows: 1 word-spacing: 0px -webkit-text-stroke-width: 0px line-height: 15pt background-color: rgb(247, 246, 243)"><span dir="rtl" style="font-size: 10pt"> روش مطمئن تر از روش سروتاپینگ در طبقه بندی و تایپینگ این ارگانیسمها مورد استفاده قرار گیرد. با اینحال تحقیقات بیشتری مورد نیاز است تا این روش بتواند جایگزین روشهای سروتایپینگ گردد.</span></span></p> <p style="text-align: justify"><span id="ctl00_ContentPlaceHolder1_DataList2_ctl00_abstractLabel0" style="color: rgb(45, 135, 179) font-style: normal font-variant: normal font-weight: normal letter-spacing: normal orphans: auto text-align: -webkit-left text-indent: 0px text-transform: none white-space: normal widows: 1 word-spacing: 0px -webkit-text-stroke-width: 0px font-family: 'Times New Roman' font-size: 12pt line-height: 17pt background-color: rgb(247, 246, 243)"><strong><span style="font-size: 10pt">Introduction & Objective :</span></strong><span style="font-size: 11pt"> </span><span style="font-size: 11pt">Salmonella is one of the most important genus of Enterobacteriacea family. The aim of this study was typing of typhoidal Salmonella by SDS-PAGE and comparing the results with those of serotyping method.</span></span></p> <p style="text-align: justify"><span id="ctl00_ContentPlaceHolder1_DataList2_ctl00_abstractLabel0" style="color: rgb(45, 135, 179) font-style: normal font-variant: normal font-weight: normal letter-spacing: normal orphans: auto text-align: -webkit-left text-indent: 0px text-transform: none white-space: normal widows: 1 word-spacing: 0px -webkit-text-stroke-width: 0px font-family: 'Times New Roman' font-size: 12pt line-height: 17pt background-color: rgb(247, 246, 243)"><strong><span style="font-size: 10pt">Materials and Methods:</span></strong><span style="font-size: 11pt"> </span><span style="font-size: 11pt">In this study, 4 reference strains of Salmonella species, 5 reference strains of Enterobacteriacea family and 100 clinical isolates of Salmonella that were previously collected from laboratories of Hamadan medical centers were studied. Serotyping of strains were performed by Biomereux and Difco monovalent antisera. Whole-cell proteins of strains were also separated on 10% poly acrylamide gel. Gels were stained by Coomassie Brilliant Blue and analyzed by densitometry. </span></span></p> <p style="text-align: justify"><span id="ctl00_ContentPlaceHolder1_DataList2_ctl00_abstractLabel0" style="color: rgb(45, 135, 179) font-style: normal font-variant: normal font-weight: normal letter-spacing: normal orphans: auto text-align: -webkit-left text-indent: 0px text-transform: none white-space: normal widows: 1 word-spacing: 0px -webkit-text-stroke-width: 0px font-family: 'Times New Roman' font-size: 12pt line-height: 17pt background-color: rgb(247, 246, 243)"><strong><span style="font-size: 10pt">Results:</span></strong><span style="font-size: 11pt"> </span><span style="font-size: 11pt">Of<strong> </strong>100 cases of Salmonella species, 43 cases (43%) were S. typhi, 20 cases (20%) were S. typhymurium, 12 cases (12%) were S. para typhi B, 10 cases (10%) were S. para typhi C, S. para typhi A 1 case (1%) and other cases were non-typhoidal Salmonella. The results of serotyping<strong> </strong>were compared with the results obtained by SDS-PAGE. Many protein bands from 220 KDa to 18.5 KDa were detected by SDS-PAGE and they were used to differentiate the strains. S. typhi serotypes were divided into 5 sub-species and S. para typhi B and C were divided each into 3 sub-species. Protein profiles of the reference strains of Salmonella were compared with protein profiles of Enterobacteriaceae species and showed some differences in major protein bands, however, they had a very similar protein band in 43 KDaarea.</span></span></p> <p style="text-align: justify"><span id="ctl00_ContentPlaceHolder1_DataList2_ctl00_abstractLabel0" style="color: rgb(45, 135, 179) font-style: normal font-variant: normal font-weight: normal letter-spacing: normal orphans: auto text-align: -webkit-left text-indent: 0px text-transform: none white-space: normal widows: 1 word-spacing: 0px -webkit-text-stroke-width: 0px font-family: 'Times New Roman' font-size: 12pt line-height: 17pt background-color: rgb(247, 246, 243)"><strong><span style="font-size: 10pt">Conclusion:</span></strong><span style="font-size: 11pt"> </span><span style="font-size: 11pt">Since our data was able to divide Salmonella species to sub-types and differentiate them from Enterobacteriacea species, we concluded that analsying SDS-PAGE profile of water soluble whole-cell proteins can be used for typing of these organisms and it is comparble with serotyping, nevertheless, further researches are needed to establish SDS-PAGE method and to replace it with serotyping method.</span></span></p> تایپینگ , سالمونلا , تخلیص پروتئین Proteins , Whole Cell , Salmonella , Typing 48 52 http://sjh.umsha.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-2-476&slc_lang=fa&sid=1 Rasoul Yousefi Mashouf رسول یوسفی مشعوف yousefimash@yahoo.com 10031947532846002024 10031947532846002024 Yes Mohammad Taghi Goodarzi محمدتقی گودرزی 10031947532846002025 10031947532846002025 No Saeed Azadi سعید آزادی 10031947532846002026 10031947532846002026 No