Avicenna Journal of Clinical Medicine

fa ارزیابی پرولیفراسیون سلولی و بیان داخل سلولی اینترفرون گاما (IFN-Gamma) در بیماران مبتلا به بروسلوز Evaluation of Cell Proliferation and Interferon Gamma (IFN-?) Expression in Patients with Brucellosis سایر تخصص هاي باليني Other Clinical Specialties پژوهشي Original <p dir="rtl" style="color: rgb(45, 135, 179); font-family: tahoma; font-size: 12px; font-style: normal; font-variant: normal; font-weight: normal; letter-spacing: normal; line-height: 20px; text-indent: 0px; text-transform: none; white-space: normal; widows: 1; word-spacing: 0px; background-color: rgb(247, 246, 243); text-align: justify;">تکثیر سلولهای T روش استانداردی برای ارزیابی ایمنی سلولی در مقابل عفونتهای داخل سلولی می باشد. علاوه برآن، امروزه بررسی سیتوکاینهای داخل سلولی ابزار مهمی برای بررسی پاسخهای ایمنی در مقابل محرکهای مختلف از جمله عوامل عفونی داخل سلولی محسوب می شود. این مطالعه با سنجش پاسخهای پرولیفراسیون سلولهای T و بررسی تولید داخل سلولی اینترفرون گاما (IFN-&upsih;) به ارزیابی پاسخهای ایمنی سلولی در خون کامل افراد سالم و بیماران مبتلا به دو فرم حاد و مزمن بروسلوز می پردازد. <p dir="rtl" style="color: rgb(45, 135, 179); font-family: tahoma; font-size: 12px; font-style: normal; font-variant: normal; font-weight: normal; letter-spacing: normal; line-height: 20px; text-indent: 0px; text-transform: none; white-space: normal; widows: 1; word-spacing: 0px; background-color: rgb(247, 246, 243); text-align: justify;">          نمونــــه های خون کامل رقیق شده 27 بیمار مبتلا به بروسلـــوز حاد (14 نفر) یا مزمن (13 نفر) (با میانگین سنی 18.2 ± 38.03 سال) و  22 داوطلب سالم (با میانگین سنی  21 ± 35.33 سال) در حضور میتوژن، باکتریهای کشته شده بروسلا ملی تنسیس یا محیط کشت تنها، کشت داده شد. تولید داخل سلولی IFN–γ در سلولهای CD3+ با روش فلوسیتومتری (CFC) بررسی گردید. پاسخهای بلاستوژنیک لنفوسیتها نیز با سنجش میزان ورود تیمیدین نشاندار در روند سنتز DNA توسط روش سنتیلاسیون مایع (LTT) ارزیابی شد. <p dir="rtl" style="color: rgb(45, 135, 179); font-family: tahoma; font-size: 12px; font-style: normal; font-variant: normal; font-weight: normal; letter-spacing: normal; line-height: 20px; text-indent: 0px; text-transform: none; white-space: normal; widows: 1; word-spacing: 0px; background-color: rgb(247, 246, 243); text-align: justify;">          در تمامی گروههای تحت مطالعه، انکوباسیون لنفوسیتهای خون محیطی در حضور میتوژن موجب بیان داخل سلولی IFN-&upsih;  و پرولیفراسیون لنفوسیتهای T گردید. در حالی که تنها سلولهای بیماران مبتلا به بروسلوز در پاسخ به آنتی ژنهای بروسلا ملی تنسیس تکثیر و تزاید یافته و  IFN-&upsih; تولید نمودند. با این حال بیان اختصاصی IFN-&upsih; در سلولهای CD3+ T و پاسخهای بلاستوژنیک لنفوسیتی در بیماران مبتلا به بروسلوز مزمن بطور معنی داری نسبت به بیماران مبتلا به بروسلوز حاد کاهش نشان داد (P<0.001). وجود ارتباط مستقیم بین درصد سلولهای CD3+ تولید کننده  IFN–γ با اندیکس تحریک پذیری(SI) در بیماران با بروسلوز حاد  بیانگر گرایش پاسخهای ایمنی به سمت Th1 در این بیماران است. <p style="color: rgb(45, 135, 179); font-family: tahoma; font-size: 12px; font-style: normal; font-variant: normal; font-weight: normal; letter-spacing: normal; line-height: 20px; text-indent: 0px; text-transform: none; white-space: normal; widows: 1; word-spacing: 0px; background-color: rgb(247, 246, 243); text-align: justify;">          شیوه های ارایه شده در این مطالعه برای ارزیابی پاسخهای ایمنی سلولی در مقابل تحریک آنتی ژنی یا پلی کلونال روشهای مفید و قابل اعتمادی می باشند. بر اساس یافته های این مطالعه، بیماران مبتلا به بروسلوز حاد با تولیدIFN-&upsih; و تکثیر و تزاید سلولی در مقابل آنتی ژنهای بروسلا، پاسخ های تیپ Th1 را نشان می دهند در حالیکه در بیماران مبتلا به فرم مزمن بیماری چنین وضعیتی دیده نمی شود. <p style="color: rgb(45, 135, 179); font-family: "Times New Roman"; font-size: 16px; font-style: normal; font-variant: normal; font-weight: normal; letter-spacing: normal; line-height: 22.6667px; text-indent: 0px; text-transform: none; white-space: normal; widows: 1; word-spacing: 0px; direction: ltr; unicode-bidi: embed; background-color: rgb(247, 246, 243); text-align: justify;">T cell proliferation is a standard method to evaluate cellular immune responses against intracellular infectious agents. Recently, intracellular cytokine assay is a valuable procedure for studying of the immune response to various stimuli such as intracellular microbes. The present study was undertaken to assess cell-mediated    immune responses in patients with acute and chronic brucellosis. <p style="color: rgb(45, 135, 179); font-family: "Times New Roman"; font-size: 16px; font-style: normal; font-variant: normal; font-weight: normal; letter-spacing: normal; line-height: 22.6667px; text-indent: 0px; text-transform: none; white-space: normal; widows: 1; word-spacing: 0px; direction: ltr; unicode-bidi: embed; background-color: rgb(247, 246, 243); text-align: justify;">          Diluted whole blood samples of patients with acute (n=14) and chronic brucellosis (n=13) with age 35.33± 21 years, and sex and age-matched healthy volunteers(n=22) were cultured in the presence of either mitogen; heat inactivated bacteria or medium alone. Intracellular IFN-γ expression in CD3+ cells was detected    by flow cytometry. Lymphoproliferation was determined by titiated thymidine incorporation using scintillation counter, to evaluate DNA synthesis. <p style="color: rgb(45, 135, 179); font-family: "Times New Roman"; font-size: 16px; font-style: normal; font-variant: normal; font-weight: normal; letter-spacing: normal; line-height: 22.6667px; text-indent: 0px; text-transform: none; white-space: normal; widows: 1; word-spacing: 0px; direction: ltr; unicode-bidi: embed; background-color: rgb(247, 246, 243); text-align: justify;">          In all groups, incubation with mitogen induced proliferation of lymphocytes and intracellular IFN-γ expression of CD3+ cells. In contrast, only brucellosis patients responded with cell proliferation and IFN-γ production against heat killedBrucella melitensis. However, blastogenic responses and IFN-γ-producing CD3+ cells were significantly decreased in response to antigen in chronic group compared to patients with acute brucellosis of patients (P<0.001). There was a close correlation between the number IFN-g- producing CD3+ cells only in acute group which shown polarization of immune responses to Th1 type. <p style="color: rgb(45, 135, 179); font-family: "Times New Roman"; font-size: 16px; font-style: normal; font-variant: normal; font-weight: normal; letter-spacing: normal; line-height: 22.6667px; text-indent: 0px; text-transform: none; white-space: normal; widows: 1; word-spacing: 0px; background-color: rgb(247, 246, 243); text-align: justify;">          Methods used in this study were useful to evaluate immune responses against specific antigen or polyclonal stimulation. Our data was shown patients with acute infection responded to Brucella antigens by IFN-g expression and proliferation and induced production of T helper 1 (Th1) cytokines, whereas chronically infected patients do not. اینترفرون گاما , بروسلوزانسانی , پرولیفراسیون سلولی , سیتو کاینهای داخل سلولی Human Brucellosis , Interferon Gamma , Intracellular Cytokine , Lymphoproliferation 10 18 http://sjh.umsha.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-2-505&slc_lang=fa&sid=1 Ali Reza Rafiei علیرضا رفیعی rafiei1710@yahoo.com 10031947532846002169 10031947532846002169 Yes Minoo Mohraz مینو محرز 10031947532846002170 10031947532846002170 No Amina Karimi Nia آمینا کریمی نیا 10031947532846002171 10031947532846002171 No