Avicenna Journal of Clinical Medicine

fa بررسی نقش نیتریک اکساید در کنترل اختلالات تکاملی جنین موش در مرحله پیش لانه گزینی در محیطهای کشت حاوی گلوکز زیاد The Study of Nitric Oxide Effects in Control of Mouse Preimplantation Embryonic Defects in High Glucosis Media سایر تخصص هاي باليني Other Clinical Specialties پژوهشي Original <p dir="rtl" style="font: 12px/20px tahoma; margin: 0cm 1.3pt 0pt 0cm; text-align: justify; color: rgb(45, 135, 179); text-transform: none; text-indent: 0px; letter-spacing: normal; word-spacing: 0px; white-space: normal; widows: 1; font-size-adjust: none; font-stretch: normal; background-color: rgb(247, 246, 243); -webkit-text-stroke-width: 0px;">حاملگی در مادران دیابـتی دارای ریسـک بالایـی از نظر مشکلات زودرس نظیر سقطهـای خودبخودی، تأخیر در مراحل اولیه رشد و نمو جنین و افزایش ناهنجاریهای مادرزادی می باشد. بنظر می رسد که افـزایش سطـح گلوکز خـون با ایجاد اختلال درتولیـد نیتریک اکسـاید(NO)  اثـرات فـوق را بوجــود می آورد. هدف از انجام این مطالعه بررسی نقش نیتریک اکساید در جلوگیری از اختلالات تکاملی و آپوپتوزیس در جنینهای موش در مرحله پیش لانه گزینی به هنگام کشت در محیط کشت حاوی گلوکز بالا (30میلی مول) می باشد. <p dir="rtl" style="font: 12px/20px tahoma; margin: 0cm 1.3pt 0pt 0cm; text-align: justify; color: rgb(45, 135, 179); text-transform: none; text-indent: 0px; letter-spacing: normal; word-spacing: 0px; white-space: normal; widows: 1; font-size-adjust: none; font-stretch: normal; background-color: rgb(247, 246, 243); -webkit-text-stroke-width: 0px;">          به منظور دست یابی به این هدف ، جنین های 2 سلولی موش در محیطهای کشت حاوی گلوکز بالا و غلظتهای مختلف پیش ساز نیتریک اکساید (L-arginine) و مهار کننده آن (L-NAME) به مدت 96 ساعت در آزمایشگاه کشت داده شدند.در پایان وضعیت تکاملی آنها با استفاده از یک میکروسکوپ معکوس ارزیابی گردید سپس جنینها با تکنیک تانل نشاندار شده و توسط یک میکروسکوپ فلوئورسنس از لحاظ میزان آپوپتوزیس مورد بررسی قرار گرفتند. میزان نیتریک اکساید تولید شده توسط جنینهای گروههای مختلف نیز با اندازه گیری مقدار نیتریت موجود در محیط پس از اتمام دوره کشت با استفاده از روش Greiss تعیین گردید. <p dir="rtl" style="font: 12px/20px tahoma; margin: 0cm 1.3pt 0pt 0cm; text-align: justify; color: rgb(45, 135, 179); text-transform: none; text-indent: 0px; letter-spacing: normal; word-spacing: 0px; white-space: normal; widows: 1; font-size-adjust: none; font-stretch: normal; background-color: rgb(247, 246, 243); -webkit-text-stroke-width: 0px;">          مقایسه نتایج بدست آمده پس از کشت جنین‌ها در گروههای مختلف نشان داد که افزایش غلظت گلوکز  در محیط از طرفی موجب کاهش تولید نیتریک اکساید شده و از طرف دیگر رشد و تکامل جنینهـا  را در مرحله پیش لانه گزینی به تاخیر می اندازد و موجب افزایـش آپوپتوزیس در آنـها می گردد. در چنیـن شرایطـی استـفاده از L-NAME که تولید نیتریک اکساید را مهار می نماید عوارض فوق را تشـدید می کند در حالیکه افزودن L-arginine به میـزان 20-10 میلی مول بطور معنی داری باعث افزایش تولید نیتریک اکساید و بهبود پتانسیل تکاملی جنینها و کاهش آپوپتوزیس در آنها می گردد. <p style="font: 12px/20px tahoma; text-align: justify; color: rgb(45, 135, 179); text-transform: none; text-indent: 0px; letter-spacing: normal; word-spacing: 0px; white-space: normal; widows: 1; font-size-adjust: none; font-stretch: normal; background-color: rgb(247, 246, 243); -webkit-text-stroke-width: 0px;">          با توجه به نتایج این مطالعه بنظر می رسد که استفاده از  L-arginine موجب افزایش تولید نیتریک اکساید در شرایط هیپرگلیسمی شده واز اثرات مخرب هیپرگلیسمی بر روی جنین های پیش لانه گزینی می کاهد.  <span id="ctl00_ContentPlaceHolder1_DataList2_ctl00_abstractLabel0" style="font: 12pt/17pt "Times New Roman"; color: rgb(45, 135, 179); text-transform: none; text-indent: 0px; letter-spacing: normal; word-spacing: 0px; white-space: normal; widows: 1; font-size-adjust: none; font-stretch: normal; background-color: rgb(247, 246, 243); -webkit-text-stroke-width: 0px;">Pregnancy in diabetic females causes delay in early stages of    embryonic growth and development and higher incidence of congenital malformations and spontaneous miscarriage compared with those of non-diabetic conditions. High glucosis tratogenicity seems to be related to reduction of Nitric Oxide production (NO) in hyperglycemic condition. The goal of present work was study of nitric oxid role in control of mouse preimplantation embryonic defects in high glucosis media. <span id="ctl00_ContentPlaceHolder1_DataList2_ctl00_abstractLabel0" style="font: 12pt/17pt "Times New Roman"; color: rgb(45, 135, 179); text-transform: none; text-indent: 0px; letter-spacing: normal; word-spacing: 0px; white-space: normal; widows: 1; font-size-adjust: none; font-stretch: normal; background-color: rgb(247, 246, 243); -webkit-text-stroke-width: 0px;">          In order to test above hypothesis, 2-cell stage embryos of normal mice were cultured with high concentration of glucose (30mM) and different concentrations of L-arginine (5,10,20 mM) or L-NAME (An antagonist of L-arginine). After 96h culture, the morphology of embryos was assessed by an inverted microscope then blastocysts were stained by TUNEL. After TUNEL the total cell number and apoptotic cells were counted by use a Fluorescence microscope. Finally the amount of nitrite in the media was assayed by Greiss method.  <span id="ctl00_ContentPlaceHolder1_DataList2_ctl00_abstractLabel0" style="font: 12pt/17pt "Times New Roman"; color: rgb(45, 135, 179); text-transform: none; text-indent: 0px; letter-spacing: normal; word-spacing: 0px; white-space: normal; widows: 1; font-size-adjust: none; font-stretch: normal; background-color: rgb(247, 246, 243); -webkit-text-stroke-width: 0px;">          The results indicated that high glucose decreases the blastocyst formation and Nitric Oxide production and increases their apoptotic index, but 10-20mM L-arginine significantly increases the developmental potential and nitric oxide production and significantly decreases apoptosis. On the contrary L-NAME significantly inhibits the development of pre-implantation    embryos . <span id="ctl00_ContentPlaceHolder1_DataList2_ctl00_abstractLabel0" style="font: 12pt/17pt "Times New Roman"; color: rgb(45, 135, 179); text-transform: none; text-indent: 0px; letter-spacing: normal; word-spacing: 0px; white-space: normal; widows: 1; font-size-adjust: none; font-stretch: normal; background-color: rgb(247, 246, 243); -webkit-text-stroke-width: 0px;">          It seems that during pregnancy supplementation of high glucose media with L-arginine increases Nitric Oxide production and prevents high glucosis embryotoxicity. آپوپتوزیس , گلوکز , مرحله پیش لانه گزینی , موش , نیتریک اکساید Apoptosis , Glucose , Nitric Oxid , Preimplantation , Rats 5 13 http://sjh.umsha.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-2-574&slc_lang=fa&sid=1 Iraj Amiri ایرج امیری 10031947532846002491 10031947532846002491 Yes Mohammad Barbarestani محمد بربرستانی 10031947532846002492 10031947532846002492 No Ahmad Reza Dehpour احمدرضا دهپور 10031947532846002493 10031947532846002493 No Marzieh Farimani مرضیه فریمانی 10031947532846002494 10031947532846002494 No Mohammad Akbari محمد اکبری 10031947532846002495 10031947532846002495 No